Основа Оксфордской среды для листерий HiMedia GM1145-500G (500 г)

HiMedia GM1145-500G Listeria Oxford Medium Base (Granulated Medium) Основа Оксфордской среды для листерий, 500г(гранулированная форма) (ФСЗ 2009/03709) ГОСТ Р 51921-2002

Рекомендуют для селективного выделения видов Listeria из патологического материала.

Состав

• Пептон специальный - 23,00 грамм/литр
• Лития хлорид  - 15,00 грамм/литр
• Натрия хлорид - 5,00 грамм/литр
• Крахмал кукурузный - 1,00 грамм/литр
• Эскулин - 1,00 грамм/литр
• Железа аммонийного цитрат - 0,50 грамм/литр
• Агар-агар - 10,00 грамм/литр

Конечное значение рН (при 25ºС) 7,2 ± 0,2

Приготовление:

Размешать 27.75 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-500С и асептически добавить растворенное содержимое 1 флакона с Оксфордской добавкой для листерий (FD71) или растворенное содержимое 1 флакона с  Моксалактамовой добавкой для листерий (FD126). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.

Принцип и оценка результата:

Listeria monocytogenes - единственный представитель рода Listeria, который имеет значение как человеческий инфекционный агент. Listeria seeligeri, Listeria welshimeri и Listeria ivanovii связаны с болезнями животных. В любом случае, все разновидности патогенны для ягнят и телят. Положительный диагноз на листериоз может быть получен только при выделении и идентификации возбудителя из крови или из образцов CSF пораженных организмов. Оксфордская Питательная Среда для Листерий основывана на рецептуре, описанной Curtis и др. (1) для выделения L. monocytogenes из клинического материала и образцов продуктов питания. Специальный Пептон обеспечивает необходимые питательные вещества для микроорганизмов. Кукурузный крахмал нейтрализует образуемые токсичные метаболиты. Хлорид лития и антибиотики ингибируют грамотрицательные и большинство грамположительных микроорганизмов, но некоторые штаммы Staphylococci могут образовывать эскулин = отрицательные колонии. Циклогексимид используется для подавления грибкового загрязнения; цефотетан и фосфомицин - ингибиторы чрезмерного развития микрофлоры. Акрифлавин, колистина сульфат и хлорид лития ингибируют бактерии кроме разновидностей Listeria. Альтернативно может быть добавлен моксалактам (FD126), который ингибирует и грамположительные и грамотрицательные бактерии.

L. monocytogenes гидролизирует эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с трехвалентными ионами железа, что визуализируется как зоны почернения вокруг колоний.

Несмотря на то, что селективности питательной среды достаточно для выделения и дифференцирования при прямой поверхностной инокуляции, желательно предварительное разбавление инокулята, особенно когда образец сильно загрязнен. Методы выделения меняются в зависимости от материала для экспертизы (2). Для всех образцов рекомендуется селективное холодное обогащение (3, 4). Для фекальные и биологические образцы гомогенизируются в 0,1% Пептонной воде (M028), и, примерно, 0,1 мл непосредственно инокулируется на Селективную среду для Листерий или в Бульон для Селективного Обогащения и инкубируется при 30°C в течение 7 дней, а затем инокулируется на Селективной среду для Листерий. Для образцов из продуктов питания и экологических образцов обычно используется селективное обогащение.Для выделения Listeria из молока и молочных продуктов, добавьте 25 мл или 25 граммов образца к 225 мл Бульона обогащения для Листерий, UVM (M890A). Осторожно смешайте и гомогенизируйте. Инкубируйте в течение 48 часов в 30°C. Посейте штрихом обогащенные культуры на Оксфордскую питательную Среду для Листерий и инкубируйте аэробно в течение 48 часов при 37°C. Возьмите 5 типичных колоний (положительный эскулин) и инокулируйте на Триптон Соевый Агар с казеиновым переваром (GM290/M290).

Инкубируйте в течение 24 часов и затем используйте эти колонии для биохимической идентификации.

Контроль качества

• Внешний вид порошка: Светло-желтая к темно-желтой гранулированная питательная среда.
• Консистенция готовой среды: Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю.
• Цвет и прозрачность готовой среды: В чашках Петри гель темно-янтарного цвета, прозрачный, с легкой опалесценцией.
• Кислотность среды: При 25°C водный раствор (5,55% вес/об) имеет рН7.0±0.2
• pH готовой среды: 6.80-7.20
• Культуральные свойства: Культуральные свойства референс-штаммов при   35-37°C через 24-48 часов при добавлении
• Оксфордской Добавки для Листерий (FD071) или добавки Моксалактам Листерия (FD126).

Условия и сроки хранения:

Сохранять при температуре ниже +30ºС в плотно закрытом контейнере. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2-8ºС.